模型制备:首先应该制备糖尿病动物模型,再进行学习及认知功能评估。模型制备方法包括:手术方法、单纯高糖高脂饮食诱导法、化学药物诱导法(本平台采用的方法:①7-8周DBA2/J小鼠用低剂量链脲佐菌素(STZ)连续注射5天,测量6小时空腹血糖来评估糖尿病的发病情况。②每两周用血糖仪测量血糖,每周记录体重、食物和水的摄入量,空腹血糖200mg/dl即为糖尿病。③糖尿病发病15周后,用异氟烷麻醉小鼠,采集血液和肾脏进行分析)、高糖高脂饮食联合小剂量STZ法[31]。评价指标:糖尿病模型的评价指标:①代谢笼进行24小时的尿液收集,测定尿量、pH、尿蛋白及肌酐量;②空腹血糖水平;③体重;④HE染色箭头表示浸润细胞;⑤PAS染色检测肾小球系膜基质扩张;⑥天狼星红染色;⑦胶原蛋白IV。以Morris水迷宫实验、新物体识别实
一、动物模型命名1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导PD小鼠模型二、模型制备规范(环境、设备、操作程序、实验操作规程)SPF级C57/BL小鼠称重,经腹腔注射,每天1次,单次注射剂量为20mg/kg,连续注射7天,此方法造模,模型损伤小。三、模型评价方法与指标体系(该模型制备采用的生理、生化和病理方法,包括行为、影像、生理生化和组织切片等技术设备,仪器设备满足模型评价的要求,指标完善,条件稳定。)1、手术24小时后对大鼠进行神经功能学评分参照评分标准功能正常时得分最高为18分,功能损伤最严重得分最低为3分,最终将得分低于17分的大鼠并且有明显、偏瘫行动障碍的大鼠剔除。①自主运动大鼠置于普通环境鼠笼中观察5分钟根据其触及鼠笼四壁的能力为其自主运动评分,评分标准如下:大鼠在环境中正常
一、动物模型命名侧脑室注射六羟多巴胺(6-OHDA)诱导帕金森(AD)模型二、模型制备规范(环境、设备、操作程序、实验操作规程)SPF级SD大鼠术前禁食12h后,腹腔注射2%戊巴比妥钠(50mg/kg)麻醉后将大鼠复位、四肢外展,俯卧位将其固定于立体定位仪上,将大鼠舌头轻轻拉向一边保持呼吸畅通。剔除颅顶部毛将头部固定在脑立体定位仪上碘伏消毒行正中切口分离皮下肌肉组织以棉球擦净血迹参照包新民所著《大鼠脑立体定位图谱》,确定纹状体左右两个注射点的坐标:A/P(距前卤中心点后)1mm;L/R(距前卤中心左右)-3mm;O/V(距脑膜表面深度)-5.5mm。在选定的坐标点用微型颅钻钻开颅骨,用微量注射器将2μg/μL的6-OHDA5μL分别注入上述两个位点,注射速度为1μL/min,注毕留针10min,退针速度为1mm/min,以防药液
一、动物模型命名线栓法制备脑卒中(MCAO)大鼠模型二、模型制备规范(环境、设备、操作程序、实验操作规程)SD大鼠称重,10%水合氯醛(0.5ml/100g)麻醉。将大鼠用医用胶带固定于操作台上,颈部剃毛。颈部酒精棉球消毒,眼科剪沿锁骨正中做竖向切口,长度约3~4cm左右。分离皮下肌肉组织,可见底部肌肉下方有轻微搏动即为颈总动脉,钝性分离覆盖于颈总动脉上方的肌肉,当分离出颈总动脉后,眼科镊小心分离伴行于颈总动脉的迷走神经,继续小心分离干净动脉周围粘膜组织,分离出的颈总动脉大约1~1.5cm左右即可。小心剔除覆盖于动脉上方的粘膜组织,此时可见颈外动脉、颈内动脉与颈总动脉呈“Y字形”分布,分离出独立的两根动脉(颈外、颈内)。血管分离完毕后,结扎颈总动脉(越靠尾部越好)。再结扎颈外动脉,两个结扎
一、动物模型命名线栓法制备脑卒中(MCAO)大鼠模型二、模型制备规范(环境、设备、操作程序、实验操作规程)SD大鼠称重,10%水合氯醛(0.5ml/100g)麻醉。将大鼠用医用胶带固定于操作台上,颈部剃毛。颈部酒精棉球消毒,眼科剪沿锁骨正中做竖向切口,长度约3~4cm左右。分离皮下肌肉组织,可见底部肌肉下方有轻微搏动即为颈总动脉,钝性分离覆盖于颈总动脉上方的肌肉,当分离出颈总动脉后,眼科镊小心分离伴行于颈总动脉的迷走神经,继续小心分离干净动脉周围粘膜组织,分离出的颈总动脉大约1~1.5cm左右即可。小心剔除覆盖于动脉上方的粘膜组织,此时可见颈外动脉、颈内动脉与颈总动脉呈“Y字形”分布,分离出独立的两根动脉(颈外、颈内)。血管分离完毕后,结扎颈总动脉(越靠尾部越好)。再结扎颈外动脉,两个结扎